Diabetes Mellitus: Analisis de PCR

TEMA :IMPLEMENTACION DE UNA PCR MULTIPLEX PARA LA IDENTIFICACIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE LOS POLIMORFISMOS EN LOS GENES HNF-1a HNF-4a 

OBJETIVO: Diseñar un PCR Multiplex DGGE para determInar mutaciones en los genes HNF 1a Y HNF 4 a.

MUESTRAS: Muestras de sangre mediante EL KIT WIZARD GENOMIC PURIFICATION 

Acido Nucleico: DNA Genomico  -KIT WIZARD GENOMIC PURIFICATION- 

GEN: HNF-1a, HNF-4a 

PCR: PCR Multiplex

• DESNATURALIZACION: 64°C
• HIBRIDACION: 60°C
• EXTENSION: 61°C

Visualizacion: EFO

REFERENCIAS:

http://www.archivos.ujat.mx/dip/Nueva%20carpeta/sem%20divul/2007/dacs.pdf

DIABETES MELLITUS: TIPO MONOGENICA

DIABETES MELLITUS: Prueba de tamizaje y Prueba confirmatoria

¿QUÉ SON LAS PRUEBAS DE TAMIZAJE O CRIBADO ?
Al conjunto de estrategias que se emplean para diagnosticar una enfermedad antes de que produzca síntomas o signos, permite la implementación temprana de medidas preventivas, principalmente cambios en el estilo de vida.

PARA DIABETES MELLITUS :
Se considera que glucemia en ayunas es la prueba más sencilla para el tamizaje oportunístico de DM en personas asintomáticas, pero la prueba de oro para el tamizaje de diabetes en estudios poblacionales sigue siendo la medición de la glucemia 2 horas post carga de glucosa   ( PTOG). 

Es muy importante tener en cuenta que una prueba de tamizaje solo indica una alta probabilidad de tener DM y debe ser confirmada con una prueba diagnóstica. 

PRUEBA DIAGNOSTICA

La hemoglobina glicosilada es la prueba diagnostica mayormente utilizada debido a que correlaciona muy bien con el promedio de glucosa en sangre durante los últimos tres meses.

REFERENCIAS: 

http://apuntesmedicos.net/2008/05/27/diagnostico-de-la-diabetes-mellitus-y-otros-problemas-metabolicos-asociados-a-regulacion-alterada-de-la-glucosa/

http://www.onetouchla.com/dom/vida-diabetes/conoce-diabetes/sobre-diabetes/los-ultimos-estudios-sobre-el-diagn%C3%B3stico-de-la-diabetes

¿Que es la diabetes?

DIABETES MELLITUS: Alteraciones en la Traducciòn

DOGMA CENTRAL:

·   TRANSCRIPCIÓN DE DNA A RNA Y TRADUCCIÓN DE RNA A PROTEÍNAS.

Cuando ocurre una mala traducción a proteínas se ven afectados procesos por la mala regulación de la glucosa en sangre.

En la diabetes monogenica tipo 1, ocurre una alteración en la traducción de unos de los factores que intervienen en la producción de glucotransportadores que son proteínas de membrana  responsables del paso de azúcar a las células.

Estudios e investigaciones determinan que hay otro tipo de RNA que no cumple con el dogma central de la genética es el RNAInc, este no se traduce a proteínas y se encontraría en el páncreas, el dna que codifica RNAInc se encuentra en zonas de genoma llamadas zonas que contienen variaciones de la secuencia de DNA que le da susceptibilidad a desarrollar Diabetes

REFERENCIAS:

http://themedicalbiochemistrypage.org/es/diabetes-sp.php

http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1561-29532010000200008

DIABETES MELLITUS : ALTERANCIONES EN LA TRANSCRIPCION

Los factores de transcripción hepatonucleares cumplen un papel clave en el desarrollo y proliferación de células beta, así como en el metabolismo de la célula beta madura. Existe una importante interacción entre estos factores de transcripción, que forman una cadena reguladora que mantiene la función de la célula beta y, por tanto, la normalidad de la homeostasis de la glucosa; sus alteraciones causan una disfunción progresiva de dicha célula34.

 Las mutaciones que se producen en estos factores de transcripción llevan a un patrón similar de disfunción de la célula beta, con una diabetes de características clínicas semejantes pero distintas asociaciones extrapancreáticas. Los sujetos con mutaciones en los factores de transcripción nacen normoglucémicos; la hiperglucemia aparece posteriormente y es progresiva, llegando a diabetes franca en la adolescencia o en la vida adulta. Casi todos los pacientes terminan por requerir tratamiento farmacológico. 

Si la enfermedad no se trata de manera adecuada, son frecuentes las complicaciones crónicas.

REFERENCIAS:

http://themedicalbiochemistrypage.org/es/diabetes-sp.php

http://www.fesemi.org/documentos/1354119962/publicaciones/protocolos/diabetes-mellitus-tipo-2/capitulo-4.pdf

DIABETES MELLITUS: Alteraciones Epigenomicas

LA EPIGENETICA implica los procesos de carencia en la regulación de uno o más genes, siendo un componente critico la distribución de la citosinas metiladas en secuencias de dineuclotidos CpG.

La metilación marca la inactivación de los genes al interferir con la unión de otros factores de transcripción sensibles a DNA metilado o bien al reunir proteínas que agrupan complejos correpresores y de acetilasas de histonas en torno a la cromatina, resultando en una herencia estable de estados regulativos.

Podemos considerar que la dieta y los factores ambientales son un punto de control importante para la regulación de la expresión génica y que durante periodos críticos de desarrollo la cromatina seria sensible a modificaciones epigenomicas. Siendo también factor importante en la actividad o inactividad física de la madre o progenie en etapas tempranas de predisponer predisponer Diabetes Mellitus II en la vida adulta por este proceso.

Referencia:

http://www.redalyc.org/resumen.oa?id=71014352002

DIABETES MELLITUS: Alteraciones en la Replicacion

La Diabetes Mellitus es conocida por su transmisión hereditaria más influyente que por factores ambientales.

Esta transmisión se da por daños o mutaciones genéticas. Uno de las principales mutaciones es del gen GCK localizado en el brazo corto del cromosoma 7, que es el encargado de producir la enzima Glucocinasa Pancreática y Hepática, que es la encargada de la transferencia del grupo fosfato desde el ATP a la glucosa formando Glucosa 6-P, el paso limitante para mantener la glucosa intracelular.

Si la mutación es heterocigoto, se da una disminución de la función enzimática, pero si la mutación es homocigota se pierde toda la actividad enzimática y puede causar diabetes neonatal permanente.

REFERENCIAS: 

http://www.fesemi.org/documentos/1354119962/publicaciones/protocolos/diabetes-mellitus-tipo-2/capitulo-4.pdf